Redução da resposta superovulatória de fêmeas bovinas superestimuladas com FSH em doses split / Reduced superovulatory response of bovine females overstimulated with FSH in split doses

Objetivou-se avaliar a superovulação (SOV) de vacas zebuínas, utilizando protocolo convencional ou protocolo com número menor de aplicações e similar dosagem (dose split). Utilizaram-se 16 fêmeas (total 32 SOV), com idade entre 17-42 meses e escore de condição corporal 2,5-4 (escala de 1-5), em delineamento tipo cross-over. No início do tratamento (D0), os animais receberam um dispositivo de progesterona e 2mg de benzoato de estradiol. As fêmeas do grupo convencional receberam 250UI de FSH/LH divididas em oito doses decrescentes administradas em intervalos de 12h (FSH/LH no D4, D5, D6 e D7 no período da manhã e tarde, nas respectivas dosagens: 50,0 UI; 37,5 UI; 25,0 UI; 12,5 UI). No D7 pela manhã, as fêmeas foram tratadas com 150μg de D+cloprostenol, e a remoção da progesterona foi realizada no D7 à tarde. As fêmeas do grupo split também receberam 250 UI de FSH/LH. No D4 de manhã, administraram-se 62,5 UI de FSH/LH via IM e 125 UI por via SC. Quarenta e oito horas após (D6) administraram-se 62,5 UI via SC e na manhã do D7 foi removida a progesterona e aplicaram-se 150μg de D+cloprostenol. As fêmeas de ambos os grupos receberam 50μg de análogo de GnRH no D8 pela manhã e foram inseminadas 12 e 24 horas após. No D15 realizou-se a colheita dos embriões em ambos os tratamentos. Avaliou-se a resposta superovulatória pela contagem do número de folículos e CLs de cada ovário, com auxílio de ultrassom. Todas as variáveis foram submetidas ao teste T de Student para amostras pareadas. Houve diferença (P<0,05) na quantidade de folículos acima de 8mm no D8 (9,06±4,54 e 5,50±4,59); número de CLs no dia da colheita (8,12± 3,26 e 4,69±3,46), número de embriões totais (6,69±3,05 e 3,37±2,50) e de embriões viáveis (5,25±2,29 e 2,37±1,78) nas vacas do grupo convencional em relação às do split, respectivamente. Conclui-se que o protocolo split tem pior resposta superovulatória e de produção in vivo de embriões, em vacas zebuínas, quando comparado ao protocolo convencional...

The aim of this study was to evaluate the superovulation (SOV) response of zebu cows, using conventional protocol or other protocol with similar dose but smaller number of applications (split dose). 16 females (32 SOV), aged 17-42 months, and body condition score of 2.5-4 (1-5 scale) were used in randomized cross-over. At the start of treatment (D0), the animals received progesterone device and 2mg of estradiol benzoate. The females from the conventional group received 250 IU of FSH/LH divided into eight decreasing doses administered at intervals of 12 hours (FSH/LH in D4, D5, D6 and D7, with their respective strengths: 50.0 IU, 37.5 IU, 25.0 IU, 12.5 IU). In D7, the females were treated with 150μg of D+cloprostenol, and the removal of progesterone device was held in the afternoon. The females from the split group also received 250 IU of FSH/LH. In the morning D4 was administered in 62.5 IU FSH/LH IM and 125 IU subcutaneously. Forty eight hours later (D6) 62.5 IU was administered subcutaneously in the morning and on D7, the progesterone device was removed and 150 μg of D+cloprostenol was applied. The females in both groups were given 50 μg of GnRH in the morning and on D8 were inseminated after 12 and 24 hours. On D15 the embryo collection was performed in both treatments. The evaluation of superovulatory response was done by counting the number of follicles and corpus luteum (CL) in each ovary, with the aid of ultrasound. The variables were assessed by Student's t test for paired samples...

Qualidade do corpo lúteo e do embrião de ovelhas Santa Inês superovuladas com FSH associado à rbST / Quality of corpus luteum and embryo of Santa Inês ewes superovulated with FSH associated with rbST

Avaliou-se o efeito da somatotropina bovina recombinante (rbST) sobre a qualidade do corpo lúteo e do embrião e sobre a concentração de progesterona (P4), em ovelhas da raça Santa Inês doadoras de embriões. Foram utilizadas 13 doadoras, distribuídas aleatoriamente em dois grupos, G1 (n=7) e G2 (n=6). Em ambos os grupos, as doadoras foram sincronizadas com implante vaginal por 14 dias, receberam 100µg de PGF2α (Ciosin®) no sétimo dia e foram superovuladas, a partir do 12º dia, com 250UI de FSH (Folltopin-V®) em seis doses decrescentes. No dia da retirada do implante, as doadoras do G2 receberam 125mg de rbST (Boostin®) e foram cobertas por macho Santa Inês a cada 12 horas até o final do estro. No sexto dia após a primeira cobrição, foram avaliadas, por laparoscopia, a resposta superovulatória e a quantidade e a qualidade dos corpos lúteos. Após as avaliações, as colheitas embrionárias foram realizadas por laparotomia. A administração da rbST no protocolo de superovulação promoveu aumento significativo (P<0,05) no número de corpos lúteos do tipo I (9,00 x 5,28) e na qualidade embrionária (4,33 x 2,00).

We evaluate the effect of recombinant bovine somatotropin (rbST) on the quality of the corpus luteum and embryo and on the concentration of progesterone (P4) in donors embryo sheep Santa Ines. 13 donors were used, randomly assigned to two groups, G1 (n=7) and G2 (n=6). In both groups, the donors were synchronized with vaginal implant for 14 days and received 100µg of PGF2α (Ciosin®) on the seventh day and were superovulated, from the 12th day, with 250IU of FSH (Folltopin-V®) in six decreasing doses. On the day of implant removal the donor G2 received 125mg of rbST (Boostin®), and were covered by Santa Inês male every 12 hours until the end of estrus. In the sixth day after the first mating were evaluated by laparoscopy, superovulatory response and the amount and quality of the corpus luteum. After the evaluations, the embryonic harvests were performed by laparotomy. The administration of rbST in superovulation protocol promoted a significant increase (P <0.05) in the number of corpus luteum of type I(9.00 x 5.28) and embryo quality (4.33 x 2.00).

Protocolo largo con análogos de GnRH versus protocolo corto con antagonistas: ¿existen diferencias en cuanto a los resultados de los ciclos de FIV-ICSI? / Protocol with GnRH analogues vs antagonists of GnRH: exist differences in the results of the IVF-ICSI cycles?

Objetivo: Valorar si existen diferencias en los resultados de los ciclos de FIV-ICSI en función del protocolo de estimulación empleado. Método: Estudio retrospectivo descriptivo de pacientes infértiles que fueron sometidas a ciclos de FIV-ICSI en el Hospital Universitario La Paz, entre los meses de enero y septiembre de 2010, comparando un protocolo largo de estimulación con análogos de GnRH vs un protocolo corto con antagonistas de GnRH. Las variables analizadas fueron: tasa de gestación, necesidad de cancelación del ciclo, dosis total de gonadotropinas requerida durante la estimulación, niveles de estradiol sérico el día de la administración de la hCG, número de folículos puncionados, complejos obtenidos, número de ovocitos maduros y de embriones conseguidos. Resultados: No hubo diferencias estadísticamente significativas en los resultados de los ciclos en función del protocolo de estimulación empleado, en ninguna de las variables analizadas. Conclusiones: Este estudio no encontró diferencias en los resultados de los ciclos de FIV-ICSI con relación al uso de análogos o antagonistas de GnRH. Es necesarios más estudios con mayores tamaños muestrales para definir qué tipo de pacientes serían subsidiarias de recibir cada tratamiento para conseguir resultados óptimos.

Aims: To assess if there exist any differences in the results of the IVF-ICSI cycles depending on the stimulation protocol employed. Methods: Retrospective descriptive study of infertile patients who underwent IVF-ICSI cycles at La Paz University Hospital, between January and September 2010, comparing sitmulation protocol with GnRH agonists vs antagonists of GnRH. The variables analyzed were pregnancy rate, cancellation rate, total dose of gonadotropin required for stimulation, serum estradiol levels on the day of hCG administration, number of follicles punctured, complexes obtained, number of mature oocytes and of embryos obtained. Results: No statistically significant differences where found in the results of cycles depending on the protocol of stimulation used in any of the variables analyzed. Conclusions: This study didn't find any difference in the outcome of IVF-ICSI cycles in relation to the use of GnRH agonists or antagonists. We need more studies with larger sample sizes to determine which is the best treatment to each patient in order to achieve optimal results.

Cessation of Gonadotropin-Releasing Hormone Antagonist on Triggering Day: An Alternative Method for Flexible Multiple-Dose Protocol

This study was performed to analyze retrospectively outcomes of stimulated in vitro fertilization (IVF) cycles where the gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist was omitted on ovulation triggering day. A total of 92 consecutive IVF cycles were included in 65 women who are undergoing ovarian stimulation with recombinant FSH. A GnRH antagonist, cetrorelix 0.25 mg/day, was started when leading follicle reached 14 mm in diameter until the day of hCG administration (Group A, 66 cycles) or until the day before hCG administration (Group B, 26 cycles). The duration of ovarian stimulation, total dose of gonadotropins, serum estradiol levels on hCG administration day, and the number of oocytes retrieved were not significantly different between the two groups. The total dose of GnRH antagonist was significantly lower in Group B compared to Group A (2.7+/-0.8 vs. 3.2+/-0.9 ampoules). There was no premature luteinization in the subjects. The proportion of mature oocytes (71.4% vs. 61.7%) and fertilization rate of mature (86.3+/-19.7% vs. 71.8+/-31.7%) was significantly higher in Group B. There were no significant differences in embryo quality and clinical pregnancy rates. Our results suggest that cessation of the GnRH antagonist on the day of hCG administration during a flexible multiple-dose protocol could reduce the total dose of GnRH antagonist without compromising IVF results.

Treatment of male subfertility with FSH in intrauterine insimination: a randomized study

A prospective randomized study was performed in 148 couples undergoing IUI because of male Subfertility. In the treatment group, 150 IU FSH were administered IM to the husbands, three times a week, starting 3 months before the beginning of IUI cycles and maintained until the fifth IUI cycle. In the control group no treatment was given. The pregnancy rate per cycle was 13.5% in the FSH group versus 10% in the non-FSH group. The pregnancy rate per woman was 44.4% in the FSH group versus 37% in the non-FSH group. This means that the pregnancy rate increase was > 30% per cycle and >20per woman in the FSH group. The cumulative pregnancy rate was 59.2% in the FSH group versus 42.9% in the non-FSH group. The pregnancy rate outside the IUI cycles was 14.7% in the FSH group versus 2.5% in the non-FSH group|

Eficácia do FSH puro e FSH recombinante em fertilizaçäo in vitro: análise preliminar / Recombinant and urinary follicle-stimulating hormone in in-vitro fertilization: preliminary data

OBJETIVO: Comparar a eficácia do FSH puro (Metrodin©) com FSH recombinante (Puregon©). CASUíSTICA E METODOLOGIA: Sete pacientes atendidas no Ambulatório de Esterilidade Conjugal do HCFMRP-USP entre 29 e 39 anos foram submetidas a dois ciclos de induçäo da ovulaçäo (com FSH puro e com FSH recombinante, näo necessariamente nesta ordem, na dose de 200 a 250 UI/dia), onde a própria paciente foi controle dela mesma. Foram avaliados além do custo de cada tratamento, o número de dias de induçäo da ovulaçäo, unidades internacionais (UI) de FSH utilizadas, folículos puncionados (maior ou igual 12 mm), oócitos captados e oócitos fertilizados. RESULTADOS: Näo houve diferença no número de dias da ovulaçäo, no número de folículos puncionados e oócitos captados. Entretanto, quando se utilizou FSH recombinante, uma menor quantidade de mediçäo foi necessária em relaçäo ao FSH puro (1464 UI ñ 284 UI/ciclo e 2014 UI ñ 407 UI/ciclo, respectivamente -p < 0,05) e houve um maior número de oócitos fertilizados (5,14ñ2,2 e 2,28ñ2,16 respectivamente -p < 0,05). CONCLUSöES: Apesar do maior custo do FSH recombinante (FSH recombinante=US$0.85/UI e FSH puro=US$0.55/UI), näo houve diferença entre o custo total dos tratamentos, já que foi necessária uma quantidade menor de medicaçäo para se obter a ovulaçäo quando se usou o FSH recombinante. O achado de um maior número de oócitos fertilizados com o FSH recombinante sugere que ele foi mais eficaz no tratamento da infertilidade conjugal, embora a casuística seja ainda limitada.

Concentración plasmática de progesterona y producción embrionaria, en vacas superovuladas bajo condiciones tropicales / Plasma progesterone concentrations and embryo yield in superovulated cows under tropical conditions in the state of Yucatan in Mexico

El presente estudio se realizó en condiciones de campo en tres ranchos de la zona centro del etado de Yucatán. El objetivo fue relacionar la respuesta ovárica y la producción embrionaria con la concentración plasmática de progesterona (P4) al día de inicio de la superovulación, al estro, y al día de la recolección embrionaria. Para ello, 11 días después del estro se superovularon 30 vacas con hormona foliculoestimulante (FSH-P) durante 4 días, a dosis decrecientes. La recolección embrionaria se efectuó 7 días después de la primera inseminación. Las donadoras con concentración plasmática de P4 > 3 ng/ml al iniciar la superovulación, tuvieron mayor promedio de cuerpos lúteos (CL: 12.4 vs. 10.2; P> 0.05); total de óvulos y embriones (TOE: 9.3 vs. 4.7; P< 0.01) y embriones transferibles (ET: 6.6 vs 3.0; P< 0.01) que las vacas con ó 3 ng/ml. Las donadoras con concentración plasmática de P4 ó ng/ml al estro, produjeron más TOE (6.9 vs. 3.0) y ET (4.6 vs. 0.0) que las vacas con > 1 ng/ml de P4. Las vacas con > 11 ng/ml de p4 al día de la recolección embrionaria tuvieron mayor promedio de CL (15.5 vs. 10.5; P> 0.05), TOE (10.0 vs. 5.9; P< 0.05) y ET (7.9 vs. 4.6; P< 0.05) que las donadoras con menor concentración plasmática de P4 (ó 11 ng/ml). Se concluye que las donadoras con concentración plasmática de P4 > 3 ng/ml al iniciar la superovulación, ó 1 ng/ml al estro y > 11 ng/ml al día de la recolección embrionaria, presentaron mejor respuesta superovulatoria y produjeron más embriones. Bajo condiciones tropicales, la concentración plasmática de progesterona, antes del inicio de la superovulación, puede ser utilizada como un indicador para seleccionar a las donadoras con mayor rendimiento potencial

Superovulaçäo de novilhas da raça Nelore com diferentes doses de FSH/LH e congelaçäo de embriöes pelo método one-step com etilenoglicol / Superovulation of Nelore heifers with different FSH/LH doses and embryo freezing by one-step method with ethylene-glycol

Este trabalho teve como objetivo identificar a dose mais eficiente de FSH/LH (300, 400 e 500 UI) no tratamento superovulatório de novilhas da raça Nelore, assim como avaliar o método one-step no processo de congelaçäo de embriöes. A variaçäo da resposta superovulatória tem sido muito grande, o que explica o interesse de diversos pesquisadores em encontrar novos hormônios, doses e momentos para realizar a estimulaçäo ovariana. Foram empregadas doses de 300 (n = 20), 400 (n = 21) ou 500 UI (n = 21) de FSH/LH, iniciando-se no décimo dia do ciclo estral, em 8 aplicaçöes decrescentes, durante quatro dias consecutivos. Foi aplicado PGF2(subscrito)a concomitante com a quinta subdose de FSH/LH e realizadas duas inseminaçöes artificiais às 12 e às 24 horas após o início dos sintomas de estro. As colheitas dos embriöes foram realizadas 6,5 dias após a primeira inseminaçäo artificial. Pelo exame ultra-sonográfico, avaliaram-se os números de folículos no momento da inseminaçäo artificial (15,12; 15,76; e 14,94) e de corpos lúteos (10,68; 11,55; e 10,81) no dia da colheita, encontrando 5,20; 1,81; e 2,76 embriöes viáveis, respectivamente, para 300 UI, 400 UI e 500 UI de FSH/LH. O grupo de 300 UI de FSH/LH apresentou os melhores resultados em relaçäo aos embriöes viáveis. Dos 106 embriöes congelados pelo método one-step em 1,5 M de etilenoglicol e transferidos pelo método nao-cirúrgico, 8 resultaram em prenhez (7,5 por cento). A dose de 300 UI de FSH/LH apresentou melhor resposta superovulatória em comparaçäo com as de 400 e 500 UI para novilhas da raça Nelore. A transferência de embriöes Bos taurus indicus congelados pelo método one-step em 1,5 M de etilenoglicol nao foi eficiente

Síndrome de ovarios poliquísticos. Inducción de ovulación con FSH pura / Polycysric ovarian syndrome. Pure FSH ovulation induction

Objetivo. Adquirir experiencia institucional en el uso de FSH "pura" para inducir ovulación en mujeres con síndrome de ovarios poliquísticos. Material y métodos. Se estudiaron durante el periodo comprendido del 1o. de junio de 1990 al 31 de mayo de 1993, 110 mujeres con diagnóstico de esterilidad anovulatoria, secundaria a síndrome de ovario poliquísticos, sin ningún otro factor causal de esterilidad, en quienes previamente ya se había intentado y fracasado la inducción de ovulación con citrato de clomifen. Se realizaron 284 ciclos de tratamiento con FSH pura, con un protocolo en el que se inicia la administración de 150 UI por vía IM del medicamento a partir del primer día del ciclo menstrual espontáneo o inducido, implementando vigilancia estrecha mediante determinaciones seriadas de estradiol sérico y seguimiento del crecimiento folicular por ultrasonografía a partir del séptimo u octavo día del ciclo, y al encontrar datos inminentes de ruptura folicular, se administraron de 5 a 10,000 UI de Hormona Gonadotropina Coriónica para favorecer la ovulación. Resultados: Se logró ovulación en 205 ciclos (72.1 por ciento), con un total de 62 embarazos que corresponde al 56.3 por ciento del total de pacientes. De estas gestaciones, 13 fueron embarazos múltiples (un quíntuple, un cuádruple, cuatro triples y siete dobles). Se perdieron 15 embarazos (24.1 por ciento) en abortos del primer y segundo trimestre y un embarazo ectópico. El síndrome de hiperestimulación ovárica se presentó en 12 casos, constituyendo el 5.8 por ciento. Conclusión. La FSH pura es el medicamento de segunda elección para inducir la ovulación en el síndrome de ovarios poliquísticos, en aquellas mujeres en quienes previamente se haya fracasado con el citrato de clomifen

Monoclonal antibodies specific for the free alpha subunit of glycoprotein hormones and their use in the development of a sensitive immunofluorometric assay

Glicoprotein hormone free alpha subunit has been used as a marker for some pituitary tumors and to study the reactivity of glycoprotein hormone-producing cells under different circunstances. We describe a highly sensitive ans specific immunofluorometric assau for the measurement of serum free alpha subunit levels. The assay is based on a monoclonal antibody, specific for free alpha subunit, bound to microtiter plates. As tracer antibody we employed an europium-labelled free/complexed alpha subunit specific monoclonal antibody. Using overnight incubation and 50µl samples, the least detectable dose was of the order of 4 ng/1. Cross-reactivity with LH, TSH, FSH, and hCG was 6.5, 1.2, 4.3 and 1.1 percent, repectively. Normal adult males showed values ranging from 120 to 790ng/l, not different from normal adult premenopausal females (88 to 604 ng/l). In post-menopausal females, serum concentrations were significantly highler, ranging from 341 to 407 ng/l. In 56 patients with untreated pituitary tumors (18 "non-secreting", 25 GH-producing and 13 prolactin-producing tumors), 10 showed high values, 3 of them from the first group, 3 from the second and 4 from the third. We conclude that this highly sensitive assay can be a valualbe tool for the diagnosis and follow-up of selected patients with pituatary tumors and in other circumstances in which the glycoprotein hormone-producing cells of the pituitary require evaluation

Ovarian sensitivity to exogenous gonadotrophins in phenobarbital treated unilaterally ovariectomized albino rats.

Adult cycling female rats were hemispayed and administered with 7.5 mg phenobarbital/100 gm body weight for 15 days. 5IU FSH or FSH+LH per 100 gm body weight was administered from day 13 to 15 to the hemispayed phenobarbital treated rats. Phenobarbital inhibits the ovarian compensatory hypertrophy significantly and increases the cholesterol and lipid levels in the ovary. Administration of FSH alone or in combination with LH restores the ovarian compensatory hypertrophy and decreases cholesterol and lipid levels significantly but LH alone is not much effective. These results suggest that the inhibition of ovarian growth may be due to the lack of availability of pituitary gonadotrophins in phenobarbital treated rats and these actions can be rectified by the administration of exogenous gonadotrophins which indicate that the ovary has not lost its sensitivity due to phenobarbital treatment.

Superovulación con hormona folículo estimulante (FSH) o gonadotropina sérica de yegua preñada (PMSG) y anticuerpos monoclonales contra PMSG en cabras fuera de la época reproductiva / Superovularion with follicle stimulating hormone (FSH) or pregnant mare serum gonadotrophin (PMSG) and monoclonal anti-PMSG in goats during the non-breeding season

Los objetivos de este estudio fueron determinar la respuesta superovulatoria con Gonadotropina Sérica de Yegua Preñada (PMSG) u Hormona Folículo Estimulante (FSH); verificar si copn el uso de anticuerpos monoclonales (ACM) contra la PMSG se mejora la respuesta ovárica de esta hormona y observar el comportamiento reproductivo de las donadoras depués de la superovulación y la colección embrionaria. La super ovulación se realizó fuera de la estación reproductiva. Se usaron 26 cabras de la raza Alpina, a las que se les implantó una esponja intravaginal impregnada con acetato de fluorogestona (45 mg), la cual se retiró a los 15 días Cuarenta y ocho horas antes del retiro de la esponja, los animales se distribuyeron al azar entre los tres tratamientos: 1 (n=8), aplicación de 1100 UI de PMSG. 2 (n=9), similar al anterior más la asministración de ACM contra PMSG y 3 (n=9),aplicación de 14 mg de FSH en ocho fracciones decrecientes. Los embriones se colectaron entre el quinto y sexto día después del estro, mediante cirugía y con sondas de Foley. Posteriormente, los animales recibieron monta natural al detectarse el primer celo poscolección. Las cabras tratadas con FSH tuvieron significativamente mayor porcentaje (P<0.05) de colección embrionaria, mayor número de cuerpos lúteos, de óvulos más embriones colectados, de embriones totales y de embriones transferibles, Los ACM no mejoraron la respuesta superovulatoria a la PMSG. La superovulación y la colección embrionaria con sondas de Foley no tuvieron efecto detrimental sobre la gestación porterior a los tratamientos.